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人間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)條件：1、合適的小鼠源細胞培養(yǎng)基是體外細胞生長增殖的重要的條件之一，培養(yǎng)基不僅提供細胞營養(yǎng)和促使細胞生長增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，而且還提供培養(yǎng)細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。2、優(yōu)質(zhì)血清目前，大多數(shù)合成培養(yǎng)基都需要添加血清。血清是細胞培養(yǎng)液中重要的成分之一，含有細胞生長所需的多種生長因子及其它營養(yǎng)成分。3、無菌無毒細胞培養(yǎng)環(huán)境無菌無毒的操作環(huán)境和培養(yǎng)環(huán)境是保證細胞在體外培養(yǎng)成功的首要條件。在體外培養(yǎng)的細胞由于缺乏對微生物和有毒物的防御能力，一旦被微生物或有毒物...

聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)（Polymerasechainraction,PCR）是一種在體外擴增特定DNA片段的方法，具有特異、敏感、產(chǎn)率高、快速、簡便、重復(fù)性好、易自動化等突出優(yōu)點，可用很短時間使目的基因或某一片段擴增十萬乃至幾百萬倍。PCR反應(yīng)基本步驟：1、變性：根據(jù)DNA高溫變性的原理，將反應(yīng)體系溫度升至變性溫度（高于模板熔點，約95℃），使目的DNA雙鏈裂解成PCR模板（單鏈）。[95℃，30s]2、退火：將反應(yīng)體系溫度驟降至退火溫度（低于引物熔點約55℃），是PCR引物與P...

影響抗原抗體反應(yīng)的兩個因素：1、反應(yīng)物自身的因素抗體：不同來源的抗體,反應(yīng)性各有差異,抗體的濃度、特異性和親和力都影響抗體抗原反應(yīng),為提高試驗的可靠性,應(yīng)選擇高特異性、高親和力的抗體作診斷試劑.等價帶的寬窄也影響抗原抗體復(fù)合物的形成,單克隆抗體不適用于沉淀反應(yīng).抗原：抗原的理化性狀、分子量、抗原決定簇的種類及數(shù)目均可影響反應(yīng)結(jié)果.顆粒性抗原出現(xiàn)凝集反應(yīng),可溶性抗原出現(xiàn)沉淀反應(yīng),單價抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合不出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象.2、反應(yīng)環(huán)境條件酸堿度：抗原抗體反應(yīng)必須在合適的pH環(huán)境中進行...

在培養(yǎng)細胞的實驗中，難免培養(yǎng)的細胞被污染了，得不到想要的實驗結(jié)果，那么你知道細胞培養(yǎng)的污染來源有哪些嗎？細胞培養(yǎng)過程中污染的來源主要有以下幾條途徑：一、不潔的動物組織標(biāo)本很多動物組織本該是無菌的(直接與外界相通的呼吸道和消化道、泌尿系統(tǒng)除外)，但由于取材時不小心也會有污染的機會。組織本身含有細菌，如取材時不用濃的抗生素洗液洗滌浸泡，也會帶菌，造成細胞污染。二、空氣空氣中含有大量的微生物，如果操作室與外界隔離不嚴(yán)或消毒不充分下，很容易造成污染。另外，凈化工作臺使用過久，濾板未定...

抗體保存溫度和條件抗體的保存方法一般會直接影響抗體的活性和使用效果。在保存得當(dāng)?shù)那闆r下，大部分抗體可以存放數(shù)月甚至數(shù)年，一般情況需嚴(yán)格按照抗體說明書來進行保存?？贵w保存溫度和條件:1、抗體收到后，需在12000rpm離心1~5分鐘，再打開管蓋進行分裝和保存，如果抗體體積不足50ul，可延長離心時間至5分鐘，從而確?？贵w全部離心下來。2、對于多數(shù)抗體而言，分裝成小等份并凍存于-20℃或-80℃是zuijia選擇。腹水形式的產(chǎn)品收到后需立即凍存，因為該類產(chǎn)品含有大量的蛋白酶，長期...

ELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗的標(biāo)準(zhǔn)程序，通常是把蛋白、抗體、或激素等（即抗原）直接或是以捕捉抗體（captureAb）固定在固相載體上，再加入一級檢測抗體（primarydetectionAb），形成一個抗原抗體的復(fù)合物。如果該抗體已經(jīng)用酶（enzyme）標(biāo)記了，即可用來直接測定抗原的量，若無，則可利用另一個酶標(biāo)記的二級抗體來測定抗原的量。測定抗原量的方法是加入該酶的底質(zhì)（substrate），作用后產(chǎn)生出現(xiàn)的顏色深淺和樣本中的抗原量呈正比的關(guān)系，依此原理計算出樣本中的抗原總量...

佰利萊生物為您講解PCR反應(yīng)效率低值解析反應(yīng)效率視為實時熒光定量PCR分析設(shè)計和優(yōu)化的關(guān)鍵因素。利用標(biāo)準(zhǔn)曲線(通過對目標(biāo)模板進行連續(xù)梯度稀釋獲得)獲取效率值。該效率值可作為總反應(yīng)的“健康”標(biāo)志。低效率與高效率所造成的影響有所不同。改善上述兩種情形的步驟則相差甚遠。理想的反應(yīng)效率為100%，但反應(yīng)效率在90–110%范圍內(nèi)都是可以接受的。確定某個特定的分析效率是否低下的方法是稀釋模板生成標(biāo)準(zhǔn)曲線(模板稀釋的范圍應(yīng)涵蓋所有未知樣本)，然后查看該范圍內(nèi)的效率。它應(yīng)盡可能接近100%...

ELISA檢測試劑盒試驗溫育解讀在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加酶結(jié)合物和顯色劑后。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱為溫育(incubation)，有人稱之為孵育。溫育的時間選擇:溫育這一步是ELISA測定中最容易出現(xiàn)問題的步驟。目前國內(nèi)ELISA試劑盒的反應(yīng)溫育時間為37℃30分鐘-1小時，進口ELISA試劑盒則通常為37℃1-2小時才能有較wan全的結(jié)合，低于1小時，可能會影響測定下限。ELISA屬固相免疫測定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表...

ELISA試劑盒結(jié)果判定：1、結(jié)果的判定嚴(yán)格依據(jù)試劑盒提供的陽性判定值（CO）進行結(jié)果判定。廠商提供試劑的同時，說明書上列出的CO值是建立在一系列科學(xué)試驗及統(tǒng)計研究的基礎(chǔ)上，不應(yīng)隨意更改。定量測定需要制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算結(jié)果。2、灰區(qū)的設(shè)置通常情況下ELISA結(jié)果報告方式為“陰性"或“陽性"，在二者之間有一條明確的分界線，也就是所謂的陽性判定值即CO值，對于樣本的吸光度值（A）高于CO值就判斷為陽性，相反則判斷為陰性，然而在實際工作中經(jīng)常會出現(xiàn)樣本A值位于CO值附近...

細胞是生命的基本單位。（除了病毒外。）細胞由細胞核組成和細胞膜還有線粒體等組成。（除個別生物）小到細菌大至鯨魚。都由細胞組成。細胞培養(yǎng)實用技巧總括:1.買細胞要去正規(guī)的地方購買，一般產(chǎn)品資料上面會有針對細胞的詳細介紹，這樣在培養(yǎng)之前可以了解細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等。2.不管是買的細胞，還是他人惠贈的細胞，剛拿到手需要趕緊做的兩件事：一檢測是否有支原體污染;二迅速擴增凍存，凍存細胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基。3.發(fā)現(xiàn)細胞有污染迅速處理掉，特別是當(dāng)養(yǎng)了很多種細胞...